O surgimento e a disseminação de microrganismos resistentes têm levantado preocupações de uma iminente crise global de doenças infecciosas. Aliado a isso, nos últimos anos o aumento de microrganismos resistentes tem sido maior do que a introdução de novas alternativas terapêuticas capazes de combatê-los. Entre os microrganismos resistentes mais importantes destaca-se a Staphylococcus aureus, bactéria Gram-positiva responsável por causar um aumento nas infecções. A alta capacidade que esse patógeno apresenta de adquirir e acumular mecanismos de resistência o torna particularmente preocupante. As bombas de efluxo são conhecidos mecanismos que mediam a resistência de S. aureus a diversas classes de antibióticos. Desse modo, diversos estudos tem sido realizados a fim de encontrar novas alternativas terapêuticas com atividade antibacteriana e que sejam capazes de inativar esse mecanismo de resistência. Nesse contexto, as chalconas mostram-se compostos promissores, em virtude da facilidade de síntese, grande número de atividades biológicas e poucos efeitos colaterais tóxicos. Este trabalho se propôs a avaliar a atividade antibacteriana da chalcona (2E) -3-({4-[(2E) -3-(4-nitrofenil) prop-2-enol] fenil} carbamoil) prop-2-ácido enóico, denominada CAP, bem como a sua ação em cepa de Staphylococcus aureus K2068 portadora da bomba de efluxo MepA. A determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) foi realizada através da metodologia de microdiluição em caldo e a análise da ação da chalcona sobre a bomba de efluxo foi realizada utilizando o brometo de etídio como marcador. Os resultados obtidos neste estudo demonstraram que a chalcona CAP não foi capaz de potencializar a ação do antibiótico ciprofloxacina assim como também não foi capaz de inibir a bomba de efluxo.

Introdução: A pré-eclâmpsia (PE) é uma doença multissistêmica exclusiva da gravidez
que surge após a 20a semana de gestação, caracterizada por hipertensão arterial e
proteinúria. A etiologia da PE é desconhecida, embora a sua fisiopatologia esteja
associada à isquemia placentária e restrição do crescimento fetal. Seu tratamento
envolve o controle dos níveis pressóricos, no entanto, o uso de fármacos é limitado
devido ao período gravídico. A cura da PE é a resolução do parto, levando a partos
prematuros e morbidade perinatal. Dito isso, é de grande importância a exploração de
substâncias vasodilatadoras da circulação feto-placentária visando evitar danos fetais.
Os metabólitos secundários apresentam grande diversidade químico-estrutural e
atividades biológicas. Dentre estes, o eugenol (EUG), da família dos fenilpropanoides,
apresenta potencial vasodilatador descrito em artéria cerebral, mesentérica, aorta e,
mais recentemente, na artéria umbilical humana normotensa (AUH-NT). Objetivos: O
presente estudo buscou avaliar o efeito vasorrelaxante do EUG em AUHs acometidas
por PE. Metodologia: O estudo foi aprovado em comitê de ética (no3.832.881). As AUHs
foram dissecadas, cortadas em anéis (3-5 mm) e tensionados em banho de órgãos
termostatizado (37o C) contendo solução nutridora, sob constante aeração e pH 7,4. O
EUG (1-1200 μM) foi administrado sobre o tônus basal, na presença de agonistas (KCl 60
mM e 5-HT 10 μM), e na presença de bloqueadores de canais de K+ . Além disso, foi
avaliado a afinidade in silico do EUG em estruturas do receptor 5-HT2A. Os parâmetros
de docagem foram definidos pela redocagem dos cristais. Resultados: O EUG causou
redução significativa do tônus basal a partir de 20 μM. Relaxou 100% as contrações
evocadas por KCl e 5-HT em 1000 μM com maior potência na via serotoninérgica: CE50
de 266,74 ± 4,90 e 153,20 ± 4,73 μM, respectivamente. Na presença dos bloqueadores
dos canais de K+ , foi obtido 100% de relaxamento para a 4-AP e GLI e 94,81% para o TEA
(1 mM), com leve alteração das CE50 em comparação com a 5-HT, sugerindo pouca
participação desses canais no efeito vasorrelaxante do EUG. Foram observadas
energias de ligação entre -5,7 e -7,4 kcal/mol-1 para o EUG, apresentando ligações de
hidrogênio com 12 das 13 estruturas testadas. Conclusão: Os resultados apontam um
importante efeito vasorrelaxante do EUG no tônus basal e vias de contração da AUH-PE,
com o estudo in silico sugerindo uma ação em potencial no receptor 5-HT2A. Com isso,
podemos sugerir que o EUG é promissor para o tratamento de distúrbios da circulação
feto-placentária. Contudo, são necessárias futuras investigações quantos aos seus
mecanismos moleculares.

O câncer é uma doença multifatorial caracterizada pelo crescimento celular descontrolado e alta taxa de mortalidade, tornando-se um dos principais desafios à saúde global. As terapias convencionais, como a quimioterapia, enfrentam limitações significativas. Nesse contexto, as lectinas tem demonstrado atividades biológicas promissora através da intreração seletiva com Carboidratos Associados a Tumores (TACs), presentes na superfície de células cancerígenas, inibindo processos como proliferação celular, angiogênese e metástase. O presente estudo investiga a lectina de Vatairea macrocarpa (VML), analisando sua citotoxicidade em linhagens tumorais humanas, seu potencial antiangiogênico e sua toxicidade em Drosophila melanogaster. Após a purificação da lectina, foram conduzidos ensaios in vitro e in vivo para avaliar as propriedades biológicas e o potencial terapêutico da lectina isolada. Os resultados demonstraram que a VML apresentou citotoxicidade seletiva significativa em células tumorais. Demonstrou efeito inibitório sobre linhagens leucêmicas, com valores de IC50 variando entre 3,5 µg/mL para HL-60 (leucemia promielocítica aguda) e 102,0 µg/mL para KG1 (leucemia mieloide aguda). Além disso, inibiu o crescimento das células A549 (câncer de pulmão) com um IC50 de 97,21 µg/mL. No entanto, não apresentou efeito sobre outras linhagens tumorais nem toxicidade para células não tumorais, como HaCat e VERO. No modelo CAM, a VML exibiu forte efeito antiangiogênico, reduzindo em 70,38% a vascularização induzida por A549 de maneira dependente da concentração, além de inibir os fatores angiogênicos VEGF (71,07%) e TGF-β (65,97%). A imunohistoquímica confirmou a redução de neovascularização e alterações estruturais na membrana corioalantóica, como diminuição de fibroblastos e células inflamatórias. No modelo com D. melanogaster não demonstrou toxicidade, sugerindo que a VML é uma molécula promissora para estudos in vivo. Diante da habilidade de interagir com carboidratos específicos na superfície celular, a VML pode contribuir para efeitos antitumorais seletivos, oferecendo uma potencial alternativa ou complemento às terapias existentes contra o câncer. 

As infecções fúngicas e bacterianas ganham destaque devido ao nível, cada vez mais alto, de resistência aos antibióticos, que esses microrganismos apresentam. Diante disso que a busca por novos alvos farmacológicos e substâncias antimicrobianas é uma necessidade. Entre essas substâncias referidas, a espécie Canavalia gladiata é uma leguminosa que, além de produzir metabólitos secundários, também sintetiza uma grande quantidade de lectinas, proteínas de ligação à carboidratos que possuem, dentre muitas funções, a de proteção antimicrobiana na planta. Desse modo, o objetivo desta tese foi avaliar o potencial antifúngico e antibacteriano de uma lectina de C. gladiata (LCG). A farinha fina das sementes de C. gladiata foi extraída em NaCl 0,15 M sob agitação constante por 4 horas. Após a centrifugação (4.000/4 °C/10 min), o sobrenadante foi submetido à cromatografia de afinidade (Sephadex G-50). O material foi dialisado e liofilizado. As cepas fúngicas utilizadas foram Candida albicans (CA INCQS 40006), Candida tropicalis (CT URM 4262) e Pichia kudriavzevii (PK INCQS 40095), já as cepas bacterianas foram Escherichia coli ATCC 10536 e Staphylococcus aureus ATCC 25923 padrões e S. aureus 10 e E. coli 06 multirresistentes, além de cepas de S. aureus portadoras de bombas de efluxo NorA (S. aureus 1199B) e MepA (S. aureus K2068). A concentração inibitória média (IC50), concentração fungicida mínima (FCM), concentração inibitória mínima (CIM) e a atividade combinada com os fluconazol (FCZ) foram determinadas usando o método de microdiluição em caldo, e a análise das transições morfológicas dos fungos foi realizada por subcultura em placas de Petri e câmaras úmidas. Os ensaios antibacterianos consistiram em determinar a concentração inibitória mínima e testar o efeito direto e combinado com antibióticos norfloxacino, ciprofloxacino, gentamicina e ampicilina, também pelo método de microdiluição. O FCZ reduziu o crescimento das leveduras nas três cepas testadas, com IC50 variando de 9,77 a 279,7 µg/mL. A LCG não apresentou atividade direta contra nenhuma das cepas fúngicas, no entanto, quando combinado com o fluconazol, mostrou inibição do crescimento nas concentrações de 1, 16 e 128 µg/mL para C. tropicalis, P. kudriavzevii e C. albicans, respectivamente. Entre as combinações de LCG+FCZ, a inibição mais significativa foi contra a cepa PK INCQS 40095, que apresentou uma inibição de 82,7%. O fluconazol inibiu completamente a transição morfológica em CT URM 4262. A LCG também teve um efeito contra essa cepa, embora tenha sido menos significativo, afetando parcialmente a morfologia (levedura/hifa). A LCG não apresentou efeito direto contra as bactérias analisadas, apresentando uma CIM ≥ 1024 µg/mL, entretanto reduziu a CIM dos antibióticos norfloxacino e ciprofloxacino frente a S. aureus 10 e S. aureus K2068 respectivamente, demonstrando um efeito combinado e potencializador dessas quinolonas.  Os resultados da ampicilina+sulbactam nas cepas bacterianas multirresistentes sugerem a inibição da enzima β-lactamase, no entanto a LCG não apresentou resultados significativos. Nas duas cepas portadoras de bomba de efluxo houve redução da CIM por parte dos inibidores padrão, mas a combinação com a LCG não determinou a inibição das proteínas de efluxo. Portanto a LCG apresenta uma potencial atividade antimicrobiana nas cepas de fungos e bactérias analisadas, mas de forma indireta, ou seja, através da modificação da ação de antibióticos, potencializando o efeito antes não efetivo.

Os solos afetados pela salinidade, natural e antrópicos, geram um impacto negativo nos ecossistemas que abrigam a biodiversidade e interferem na fertilidade do solo, na degradação pela perda de nutrientes, na diminuição da produtividade agrícola e promove o acúmulo de íons tóxicos pelas culturas vegetais. Os íons de sódio (Na+) e cloreto (Cl-) competem com sítios de absorção de macronutrientes importantes devido aos raios iônicos e cargas similares, concentrando-se em excesso nos tecidos da planta e induzindo danos oxidativos. Entretanto, as melhores capacidades de regulação da entrada desses íons e a proteção antioxidativa podem ser associadas com a tolerância à salinidade. Objetivou-se comparar tais mecanismos de tolerância ao estresse salino em duas gramíneas forrageiras Urochloa brizantha cv. piatã (Hochst. ex A.Rich.) e Megathyrsus maximus cv. tanzânia (Jacq.) B.K.Simon e S.W.L.Jacobs. Os experimentos foram organizados da seguinte maneira: O experimento I objetivou analisar a emergência, o crescimento inicial e o equilíbrio iônico das gramíneas forrageiras submetidas a cinco níveis de NaCl a 0; 0,6; 1,2; 1,8 e 2,4 g/kg de areia de textura média. Foram analisados os teores dos íons de Na+ e K+ nos tecidos vegetais por fotômetro de chama, e o teor de Clpor titulometria com nitrato de prata. O estresse salino reduziu o crescimento de ambas as cultivares; contudo a sobrevivência da cultivar Piatã foi afetada severamente nos níveis mais altos de salinidade. Além disso, Piatã acumulou mais Na+ e Clnos seus tecidos do que Tanzânia. Com a finalidade de observar se essas respostas são exibidas em outras fases de desenvolvimento das plantas e entender o papel do sistema radicular na exclusão dos íons tóxicos e outros mecanismos de adaptação, um segundo experimento foi planejado para aplicação do estresse em solução nutritiva. Os capins foram submetidos ao estresse salino com 120 mM de NaCl a partir do vigésimo dia após semeadura, sendo as plantas coletadas aos 10 e 20 dias após exposição ao estresse. Em cada tempo de coletas foram analisados: os comprimentos e massas frescas da folha, colmo e raízes; os teores dos íons Na+, K+, Cl- e N total, os teores de prolina, açúcares solúveis, amido e proteínas solúveis; danos oxidativos e a atividade e isoformas de enzimas antioxidantes, catalase, peroxidase de guaiacol e a dismutase de superóxido. Os resultados indicam que o capim Tanzânia desempenhou mecanismos mais eficientes para o controle do acúmulo de íons Na+ e Clnos tecidos aéreos, sendo mais evidente aos dez dias de exposição ao estresse. Os teores de K+ mostraram reduções nos tecidos aéreos de Piatã aos 10 dias de exposição ao estresse; enquanto as reduções nos tecidos aéreos em Tanzânia se observaram primeiro nos colmos a partir de vigésimo dia de exposição à salinidade. Os teores de N total reduziram significativamente nas duas cultivares, sendo maior a redução em Piatã aos 10 primeiros dias de exposição ao estresse. Os teores dos pigmentos fotossintéticos foram severamente afetados e de forma similar em ambas as espécies. A prolina teve maior acúmulo nos tecidos de Piatã em ambos os tempos de exposição ao estresse salino. De modo geral, açúcares solúveis acumularam-se em folhas de ambas as espécies; destacando-se os incrementos de frutose e sacarose em folhas de Piatã aos 10 dias de exposição à salinidade. A salinidade induziu maior acúmulo de malondialdeído nas folhas de Piatã. A atividade da dismutase de superóxido e da peroxidase aumentou em folhas e raízes de ambas as espécies; enquanto a atividade da catalase aumentou em todos os tecidos de Piatã e apenas nas raízes de Tanzânia. A análise da atividade em gel de eletroforese (zimogramas) corroboraram o comportamento das enzimas, e revelaram a indução de isoformas específicas sob condições de estresse. A PCA revelou que mecanismos de tolerância associados às raízes (os teores de sódio (NaR), a atividade da peroxidase de guaiacol (PodR) e da superóxido dismutase (SodR)), e folhas (comprimento (CF), o teor glicose (GliF)) são determinantes da tolerância do capim Tanzânia a condições de estresse salino. Por outro lado, as variáveis em folhas do capim Piatã (cloreto (Cl-F), prolina (ProlF), malondialdeído (MDAF) se relacionam com a sensibilidade ao estresse salino. Os resultados demonstram uma tolerância contrastante em ambas as espécies ao estresse salino. A maior tolerância à salinidade de capim Tanzânia deve-se a ativação de mecanismos de exclusão de sódio, envolvendo um fortalecimento dos sistemas radiculares e uma osmorregulação mediada por glicose.

A descoberta e utilização dos antibióticos permitiu o tratamento das infecções e redução dos índices de mortalidade associado aos patógenos bacterianos. No entanto, de maneira simultânea, estes patógenos progrediram para resistência aos antibióticos. Somado a isto, hoje já não são mais produzidos antibióticos como no século anterior e isso se deve aos custos e rentabilidade em comparação à fabricação de outros fármacos. Estes determinantes suscitam a necessidade de se desenvolver novas alternativas terapêuticas. Por muito tempo as políticas públicas de saúde recorreram às drogas de último recurso ou a aumento das concentrações farmacológicas dos antibióticos, mas estas estratégias, apesar de imediatas, são insuficiente e encarecem o tratamento das infecções, além de resultar no aumento de efeitos adversos. Com isso, para ser considerado promissor um fármaco precisa ter uma estrutura bem definida. Os polioxometalatos (POM’s) representam uma classe de compostos inorgânicos com diversidade de funções, tamanhos e composição química, características estas alvejadas atualmente. O plano de redação deste estudo se divide em dois importantes eixos: 1- a revisão integrativa e bibliométrica da literatura e 2- a realização dos ensaios de caracterização química e de atividade microbiológica. O levantamento integrativo e bibliométrico foi realizado através das bases de dados Scopus e Web of Science, através dos descritores “Polioxometalatos” e “Polioxometalatos e atividade antibacteriana”. A partir deste foram selecionados 38 e 36 artigos, respectivamente, para cada base indexada. A bibliometria apresentou a relação entre as palavras-chave dos artigos selecionados e dados acerca do acoplamento bibliográfico. O último demonstrou que, do total de estudos levantados, 27 estavam correlacionados na Scopus e 31 na Web of Science. Os gráficos de predominância permitiram verificar que as bactérias mais utilizadas nos estudos são a Escherichia coli e Staphylococcus aureus, por meio do método de microdiluição. A caracterização química dos compostos ocorreu por espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier de refletância total atenuada (ATR-FTIR), revelando um padrão de bandas para os compostos que estavam situadas entre 84-1915 cm-¹. Por meio da metodologia de microdiluição seriada, com revelação colorimétrica, os estudos microbiológicos investigaram o efeito direto dos compostos sob as bactérias de importância clínica Escherichia coli e Staphylococcus aureus, sendo verificado também o efeito subnibitório combinado aos antibióticos tradicionais. Para avaliar a inibição da atividade da betalactamase, verificou-se a capacidade dos compostos de diminuir a MIC da ampicilina contra as linhagens multirresistentes de Staphylococcus aureus K-4414 e K-4100. Os molibdatos e tungstatos não apresentaram atividade antibacteriana direta, no entanto potencializaram o efeito dos antibióticos tradicionais ampicilina e gentamicina, em diferentes circunstâncias contra as bactérias Escherichia coli 06 e Staphyloccocus aureus 10. O ácido molibdico, o molibdato de potássio, o tungstato de cálcio e tungstato de sódio inibiram o efeito de resistência apresentado pelas bactérias S. aureus-K4100 e K-4414. Dado o atual cenário de resistência, estes resultados representam novas alternativas para o tratamento de infecções bacterianas, permitindo uma melhor compreensão das propriedades dos POM’s. Estes resultados são pioneiros, em termos de publicação.

Urochloa brizantha cultivar piatã é uma forrageira tropical amplamente cultivada por
seu valor nutritivo e adaptabilidade a solos de baixa fertilidade. Entretanto, o cultivo
dessa gramínea apresenta-se ameaçado quando em solos com elevados níveis de sais. A
salinidade altera o equilíbrio iônico e o estado redox da planta, provocando alterações
que contribuem à perda de produtividade vegetal. Neste sentido, fazem-se necessários
métodos para amenizar os efeitos gerados pelo estresse salino, sendo a aplicação de
hormônios vegetais uma forma eficiente para tais fins. A proposta do presente estudo é
avaliar as respostas de tolerância ao estresse salino em U. brizantha quando tratadas
com o ácido indolacético (AIA). Inicialmente foram conduzidos experimentos para
selecionar uma concentração adequada do hormônio (50, 200 e 800 µM) via aplicação
foliar em plantas submetidas ao estresse salino com NaCl a 100 mM . Foram feitas
análises de crescimento pela passagem e medidas de comprimento dos tecidos aéreos e
radiculares, determinação dos teores de sódio e potássio por fotômetria de chama, e
metodologias espectrofotométricas para análise de conteúdos de clorofilas,
carotenoides, prolina e peroxidação lipídica. Os resultados evidenciaram que em
menores concentrações de AIA houve uma melhor regulação dos teores de Na + ,
aumento no conteúdo dos pigmentos fotossintéticos e redução de prolina em plantas
estressadas. Sendo assim foi desenvolvido um segundo experimento com a aplicação
foliar de 50 µM de AIA quando plantas foram, desta vez, submetidas ao estresse salino
com NaCl a 75 mM. Nesse experimento foram avaliados os mesmos parâmetros que no
anterior, com a inclusão de análises de conteúdo relativo de água, vazamento de
eletrólitos quantificação de peróxido de hidrogênio e atividade das enzimas catalase
(CAT), guaiacol peroxidase (POD) e superóxido dismutase (SOD). A atividade
enzimática da POD também foi avaliada por zimografia. Os resultados mostraram que o

tratamento com AIA em plantas estressadas não promoveu o crescimento vegetal nem
indução de atividade enzimática, entretanto foi constatado a redução do vazamento de
eletrólitos, peroxidação lipídica e peróxido de hidrogênio, bem como a diminuição dos
teores de sódio e retenção de potássio nas folhas do capim piatã, revelando uma possível
participação do AIA na regulação da homeostase iônica. Conclui-se que o AIA induziria
a tolerância ao estresse salino em U. brizantha ao agir sobre processos que controlam o
transporte de sódio e potássio aos tecidos aéreos.

Lectinas são proteínas bioativas naturais encontradas em bactérias, fungos, animais e plantas, capazes de interagir com oligossacarídeos, monossacarídeos e glicoconjugados por meio de um domínio de reconhecimento a carboidratos. Lectinas de plantas, especialmente as das leguminosas, têm sido extensivamente estudadas por apresentarem variados efeitos biológicos, incluindo a capacidade de inibir o crescimento de fungos. Em virtude de sua atividade fungicida e da biodegradabilidade, lectinas vegetais podem ser empregadas no controle das doenças causadas por fungos fitopatogênicos. Diante disso, este trabalho buscou avaliar o efeito inibitório das lectinas de Vatairea macrocarpa (VML) e de Parkia platycephala (PPL) sobre o crescimento dos fungos fitopatogênicos Colletotrichum okinawense, C. siamense, Lasiodiplodia theobromae e Rhizoctonia solani AG-4 HGI. Para tanto, as lectinas foram purificadas por cromatografia de afinidade, liofilizadas e testadas quanto à pureza por SDS-PAGE e à atividade hemaglutinante. Para testar o efeito inibitório das lectinas, os isolados fúngicos foram cultivados em meio BDA contendo VML (1000 μg/mL) e PPL (100 e 200 μg/mL), separadamente. Como controles positivos, foram usados os fungicidas pencicurom e tiofanato metílico. Placas contendo somente BDA foram utilizadas como testemunhas. O crescimento de C. siamense (isolado CMM 4081) reduziu com a utilização de tiofanato metílico e da lectina PPL a 200 μg/mL, sem diferirem entre si, mas diferindo dos demais tratamentos. Na presença da lectina PPL a 200 μg/mL, o crescimento do isolado CMM 2295 de L. theobromae foi inferior ao observado na testemunha. A lectina VML foi efetiva na redução do crescimento micelial do isolado CMM 4039 de L. theobromae, assemelhando-se ao observado com a utilização de tiofanato metílico. As lectinas VML e PPL não apresentaram atividade inibitória sobre o crescimento de C. okinawense e R. solani. A atividade inibitória dessas lectinas pode ser espécie-dependente em relação a Colletotrichum e isolado-dependente em relação a L. theobromae. Os resultados estimulam futuras pesquisas com lectinas visando a obtenção de formulações para o controle das doenças causadas por fungos em plantas na pós-colheita.

A azitromicina (AZT) está entre os antibióticos mais bem-sucedidos e altamente prescritos no mundo, sendo utilizada no tratamento de primeira linha para infecções do trato respiratório, doenças sexualmente transmissíveis, infecções dérmicas e outras manifestações bacterianas. Entretanto, para os casos em que se faz necessário medir os níveis do princípio ativo em matrizes complexas, ou ainda, quando se quer estudar a reatividade e estabilidade da molécula, o número de possibilidades analíticas com os requisitos necessários para estas finalidades ainda é limitado. Neste trabalho, uma proposta inovadora foi desenvolvido com um sensor eletroquímico à base de molibdato de cério (Ce₂(MoO₄)₃) e nanotubos de carbono de parede múltiplas (MWCNT) integrados em uma pasta condutora de carbono. Apesar da elevada reatividade dos materiais presentes no dispositivo resultante (Ce₂(MoO₄)₃-MWCNT/EPC) para analisar a oxidação do antibiótico, dados experimentais e simulações computacionais revelaram que a solubilidade e eletroatividade do antibiótico melhoram em eletrólito alcalino (pH = 8) preparado em mistura binária de CH₃OH/H₂O (10:90%, v/v). A resistência de transferência de carga e, consequentemente, a sensibilidade do dispositivo também melhorou após o tratamento térmico de Ce₂(MoO₄)₃-MWCNT/EPC, como forma de eliminar a água reticular contida nos microcristais de molibdato. Há evidências de que a oxidação do antibiótico sobre o sensor eletroquímico ocorre de forma irreversível, com indícios de liberação de 2e^‒ da desosamina. Após a otimização dos parâmetros eletroanalíticos, foi possível detectar AZT com limite de detecção de 230 nm, além de alta precisão dos resultados, demonstrada por desvios de resultados abaixo de 4,5%. O dispositivo mostrou aplicabilidade para avaliar a estabilidade termo-oxidativa da AZT sob condições variadas de temperatura, radiação ultravioleta e saturação ao ar atmosférico. Os resultados fortalecem a ideia de que o controle de qualidade dos medicamentos à base de AZT deve ser feito de forma contínua, em padrões laboratoriais não-ideais e mais próximos daqueles observados durante o transporte, armazenamento e administração dos produtos, como forma de fazer uma avaliação mais rigoroso da validade e viabilidade do ingrediente ativo nas formulações, assim como zelar pela saúde dos consumidores.

Os carboidratos são as moléculas orgânicas mais abundantes do planeta, sendo importantes
em mecanismos de reconhecimento e interação intercelular e para a saúde. Diferentes formas
de controle dos níveis de glicose tem sido alvo de muitas pesquisas que visam facilitar e/ou
aprimorar a detecção desse monossacarídeo em fluidos biológicos, alimentos e formulações
comerciais. Devido à capacidade de ligação reversível e específica a carboidratos, as lectinas
são proteínas que vêm ganhando espaço como moléculas de reconhecimento no
desenvolvimento de biossensores eletroquímicos para glicose. As lectinas de leguminosa são
amplamente estudadas e caracterizadas, sendo a lectina isolada de Canavalia ensiformes
(ConA) a mais conhecida desse grupo. Pela diversidade de propriedades de acordo com a
fonte de obtenção, as lectinas de fungos também mostram potencial biotecnológico. A espécie
Ganoderma applanatum, por exemplo, apresenta uma lectina (GAL) com afinidade por
glicose e que apresenta resistência moderada a variações de pH (4 - 8) e temperatura (20 – 60
ºC), embora com atividade hemaglutinante melhor conservada em condições fisiológicas.
Neste trabalho foram desenvolvidos dois sistemas de biorreconhecimento para glicose com a
ConA e a GAL, utilizando eletrodo de carbono vítreo (GCE) modificado com o
hexacianometalato Azul da Prússia (PB) que, além de ser um material semicondutor, possui
regiões de densidade eletrônica heterogêneas e adequadas para a adsorção das proteínas,
através de ligações intermoleculares. Os resultados obtidos por diferentes técnicas
comprovaram que o problema de instabilidade do PB em pH fisiológico pode ser solucionado
por tratamento térmico a 100 ºC por 1h, levando ao suporte eletródico de ta-PB/GCE. O uso
de inteligência artificial associado a parâmetros eletroquímicos possibilitou estudos estruturais
e a obtenção de dados sobre as condições biocompatíveis e eletrostaticamente favoráveis para
imobilização da GAL em ta-PB/GCE, que também foram úteis nos estudos com a ConA. O
biossensor GAL/ta-PB/GCE apresentou ótimo desempenho eletroquímico para a
quantificação de glicose em condições ideais, alcançando um limite de detecção de 10,2 pM e
sensibilidade de 0,012 µA µM ‒1 cm ‒2 . A performance obtida com ConA/ta-PB/GCE foi
satisfatória, alcançando um limite de detecção de 0,96 µM e sensibilidade de 3,94 × 10 3 µA
µM ‒1 cm ‒2 . A seletividade dos ensaios foi influenciada por outros carboidratos, incluindo
frutose, maltose e sacarose, provavelmente pela regiosseletividade moderadamente baixa
alcançada com sítios de interação superficiais dessas proteínas, mas sem comprometer a
viabilidade dos dispositivos para a eletroanálise de glicose em amostras complexas. Ambos os
biossensores foram testados para a quantificação de glicose em formulações farmacêuticas, alcançando valores de recuperação entre 98,0% e 100,5%. O biossensor ConA/ta-PB/GCE foi aplicado com êxito para a análise de açúcares totais em amostra de refrigerante. Cada dispositivo apresentou vantagens particulares e desafios que ainda demandam mais estudos, porém o conjunto de figuras de mérito obtido em cada sistema comprovou que as plataformas desenvolvidas são verdadeiramente eficientes para a análise de glicose em diferentes amostras, estimulando mais pesquisas com o desenvolvimento de biossensores eletroquímicos à base de lectinas para carboidratos de relevância biológica.

As leishmanioses são caracterizadas como um conjunto de doenças de interesse clínico e epidemiológico que possuem distribuição mundial. O tratamento para esta doença baseia-se primariamente no uso de antimoniais pentavalentes (Sb ⁺⁵), sendo no Brasil utilizado o antimoniato de meglumina (Glucantime®) e em alguns casos na aplicação de drogas secundárias, como a anfotericina B. Esses medicamentos apesar de promissores, apresentam diversas limitações e importantes efeitos colaterais, o que fomenta a pesquisa por novos medicamentos que apresentem baixa toxicidade e poucos efeitos adversos. Dentro deste cenário, destacam-se as lectinas, proteínas que apresentam diversas funções nos organismos em que são encontradas. O presente estudo teve por objetivo avaliar o efeito leishmanicida in vitro da lectina das sementes de D. violacea (DVL) em cultura de cepa de Leishmania infantum. Formas promastigotas foram incubadas com diferentes concentrações de DVL (324 – 5,06 μg/mL) e a viabilidade celular determinada por  contagem em câmara de Neubauer. Através determinação da CI₅₀ foi avaliada a participação do domínio de reconhecimento a carboidratos (DRC) na atividade da lectina. Ensaios de fluorescência com o diacetato de 2’,7’-diclorodihidrofluoresceína (DCFH2-DA) e Iodeto de Propídio (IP) foram realizados a fim de verificar a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) e danos a integridade da membrana celular parasitária, respectivamente. Microscopia eletrônica de varredura foi utilizada para avaliar as possíveis alterações morfológicas induzidas pela DVL em formas promastigotas. Também foi testado o efeito da associação entre a DVL e a Anfotericina B e o glucantime sobre formas promastigotas. Por meio do teste do brometo de 3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il) -2,5 difeniltetrazólio (MTT) foi possível determinar a citotoxicidade da DVL em macrófagos Raw 264.7, bem como o efeito da associação desta com a anfotericina B sobre estas mesmas células. Para mais, foi verificado ainda o efeito da DVL sobre formas amastigotas da cepa de L. infantum.  DVL inibiu o crescimento de formas promastigotas de maneira concentração e tempo dependentes, com valores CI_50/24h = 49,37 μg/mL; CI_50/48h = 37,47 μg/mL; CI_50/72h = 34 μg/mL. Os dados obtidos mostraram que a atividade da lectina esta relacionada à sua capacidade de reconhecer e se ligar a glicanos presentes em L. infantum e o tratamento com esta é capaz de induzir a produção de EROs, danos a integridade da membrana celular e alterações morfológicas nos parasitas. Além disto, a lectina mostrou-se capaz de modular a ação da anfotericina B e do glucantime melhorando o efeito destes em formas promastigotas.  DVL não apresentou citotoxicidade em células Raw 264.7, demonstrando um aumento da viabilidade destas células, efeito também observado na avaliação da associação entre a DVL e a anfotericina B sobre as células. Ademais, com o uso da CI₅₀ (50 μg/mL) foi possível observar uma redução no índice de sobrevivência dos macrófagos infectados com formas amastigotas, bem como uma redução no percentual de infecção dos mesmos. Os resultados sugerem que a DVL é uma ferramenta promissora para o tratamento das leishmanioses, entretanto mais estudos são necessários para elucidar os prováveis mecanismos de ação.

O estresse oxidativo, caracterizado pelo acúmulo de espécies reativas de oxigênio (EROs), está implicado na patogênese de várias doenças, incluindo a hipertrofia cardíaca. Embora as EROs sejam essenciais para vários processos fisiológicos, quantidades excessivas podem danificar os componentes dos cardiomiócitos, comprometendo a sua função e, assim, desencadeando uma série de alterações adversas, como fibrose cardíaca, contração prejudicada, morte celular por necrose e apoptose. A cadeia de transporte de elétrons mitocondrial (CTE) é uma fonte conhecida de EROs. Como as mitocôndrias são responsáveis por cerca de 25% da massa dos cardiomiócitos, elas são consideradas uma das fontes mais significativas de EROs no coração. Dessa maneira, as mitocôndrias têm sido alvo de vários estudos que utilizam modelos de hipertrofia cardíaca. A quercetina, pertencente à classe dos flavonóides, é uma potente depuradora de EROs, tendo se tornado alvo de atenção por apresentar diversos efeitos benéficos no sistema cardiovascular, incluindo efeitos anti-hipertróficos. Neste trabalho foi testada a hipótese de que a quercetina é capaz de atenuar a hipertrofia cardíaca ao melhorar o balanço redox e a homeostase mitocondrial. Para tal, tratamos camundongos com injeções intraperitoneais de isoproterenol (30 mg/kg/dia) por 4 dias consecutivos. No quinto dia, alguns desses animais foram eutanasiados e os demais camundongos foram remanejados em dois subgrupos. A partir desse ponto, um grupo recebeu apenas isoproterenol (grupo ISO) (30 mg/kg/dia) e outro grupo recebeu isoproterenol e quercetina (grupo ISO+QUE) por via oral (10 mg/kg/dia) por mais 4 dias. Os animais tratados com ISO durante 4 dias apresentaram aumento da relação peso cardíaco/comprimento da tíbia, aumento do teor de proteínas totais, diminuição do teor de proteínas sulfidrilas, comprometimento da atividade de enzimas antioxidantes e alta produção de peróxido de hidrogênio (H₂O₂). A intervenção com o tratamento com quercetina a partir desse ponto foi capaz de atenuar a hipertrofia cardíaca, restabelecer os níveis de proteínas sulfidrilas e a atividade antioxidante, além de bloquear efetivamente a produção de H₂O₂. Além disso, observamos que o estímulo hipertrófico do isoproterenol diminui a expressão e atividade de superóxido dismutase mitocondrial (MnSOD), enquanto que a quercetina reverte esse efeito. Observamos também que a quercetina protege as mitocondrias contra a abertura do poro de transição de permeabilidade mitocondrial (mPTP) in vivo e in vitro. Em conjunto, esses resultados mostram que a quercetina é capaz de atenuar a hipertrofia cardíaca induzida por isoproterenol ao melhorar a função mitocondrial e o equilíbrio redox.

O fungo do gênero Rhizoctonia causa uma das principais doenças do feijão-caupi, a leguminosa alimentar mais importante da região Nordeste do Brasil e com grande área plantada na região do Cariri cearense. A identificação desse fungo se baseia, principalmente, na classificação em grupos de anastomose de hifas (AGs). O presente estudo teve como objetivos determinar: a) quais espécies e AGs de Rhizoctonia ocorrem em áreas de cultivo de feijão-caupi no Cariri cearense usando sequenciamento da região espaçadora transcrita interna (ITS) do DNA ribossômico (rDNA), e b) a variação em agressividade entre os isolados e AGs associados com essa leguminosa. Plantas de feijão-caupi com sintomas de podridão de colo e de raiz, típicos dos induzidos por Rhizoctonia, foram coletadas em 32 áreas de produção localizadas em 18 municípios do Cariri cearense, durante os anos de 2018 e 2019. Dos materiais vegetais sintomáticos foram efetuados isolamentos dos fungos associados e obtidas culturas puras de Rhizoctonia. Foram obtidos 41 isolados de Rhizoctonia das áreas de feijão-caupi no Cariri cearense. O DNA genômico foi extraído de todos os isolados de Rhizoctonia e efetuada a amplificação por PCR da região ITS-rDNA com os primers ITS1 e ITS4. Os produtos da PCR foram purificados e sequenciados. Sequências nucleotídicas de isolados de referência de Rhizoctonia obtidas no GenBank foram incluídas nas análises e as relações filogenéticas foram analisadas pelo método de Máxima Verossimilhança. A patogenicidade e a agressividade de isolados representando os AGs identificados foram testados em plantas de feijão-caupi. A análise filogenética da região ITS permitiu a identificação de quatro AGs, sendo dois de R. solani (AG-4 HGI e AG-4 HGIII) e dois de Rhizoctonia binucleada (AG-Fa e AG-L). Esse é o primeiro relato, em nível mundial, da associação de AG-4 HGIII, AG-Fa e AG-L com feijão-caupi. AG-4 HGI foi o mais frequente (53,7%), estando amplamente distribuído no Cariri cearense. Entre os municípios produtores de feijão-caupi nessa região, Mauriti apresentou a maior diversidade de AGs (AG-4 HGI, AG-4 HGIII e AG-Fa). Todos os isolados foram patogênicos ao feijão-caupi e houve diferença na agressividade entre os diferentes isolados dentro do mesmo AG de Rhizoctonia. Para nosso conhecimento, esse é o primeiro relato detalhado da composição dos AGs de Rhizoctonia associados ao feijão-caupi no Cariri cearense e amplia os conhecimentos sobre esse assunto no Brasil e no mundo.

A hipertrofia cardíaca é uma resposta compensatória do coração frente a um aumento de volume ou pressão arterial. Embora seja uma resposta benéfica temporária, frequentemente, leva à cardiomiopatia hipertrófica e à insuficiência cardíaca congestiva. A restrição calórica (RC) é uma poderosa intervenção para melhoria da saúde e retardo do envelhecimento, seus efeitos envolvem melhora no metabolismo energético e estresse oxidativo, no qual as mitocôndrias desempenham um papel central. A mitocôndria possui um canal de potássio sensível a ATP (mitoKATP), cuja abertura leva a proteção celular através de mecanismos relacionados à diminuição do estresse oxidativo celular. Neste ensaio investigou-se o papel da RC na prevenção da hipertrofia cardíaca induzida pelo isoproterenol in vivo por evitar a produção de espécies reativas de oxigênio e manter a atividade antioxidante. Adicionalmente, investigou-se o envolvimento do mitoKATP na hipertrofia cardíaca. Afim de estabelecer um protocolo para indução da restrição calórica em camundongos, contabilizou-se (em gramas) o consumo de dieta padrão de camundongos Swiss durante 2 semanas. Após este período os animais foram divididos, aleatoriamente, em dois grupos: com ingestão ad libitum (grupo AL) e alimentado com 60% do consumo médio de calorias (grupo RC – calculado como anterioremente) durante 4 semanas adicionais. Para induzir hipertrofia cardíaca, os animais foram tratados com isoproterenol (ISO) (30 mg/ kg / dia) durante 8 dias. Para inibição do mitoKATP, bloqueadores, 5-hidroxidecanoato (5-HD) (10 mg / kg / dia) e glibenclamida (GLI) (6 mg/kg/dia) foram utilizados a partir do 5º dia. Camundongos tratados com ISO tiveram elevada relação peso do coração/ comprimento da tíbia e níveis aumentados de proteína cardíaca. Esses mesmos marcadores hipertróficos foram significantemente reduzidos em camundongos RC tratados com ISO. O tecido cardíaco de camundongos em restrição calórica, tratados com ISO produziram menos H2O2 e apresentaram menor oxidação de proteínas. Adicionalmente a RC bloqueou a repressão da atividade antioxidante, induzida pela hipertrofia, das enzimas superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase. Notavelmente, demonstrou-se que a atividade do mitoKATP foi reprimida em mitocôndrias isoladas de corações hipertróficos, de maneira sensível à RC. Finalmente, como prova do princípio do envolvimento do mitoKATP na proteção contra a hipertrofia observou-se aqui que a inibição farmacológica do mitoKATP (usando 5-HD e GLI) bloqueou significantemente os efeitos protetores da RC. Juntos esses dados sugerem que a RC melhora o equilíbrio redox durante a hipertrofia cardíaca, e realiza esse processo em um mecanismo envolvendo a ativação do mitoKATP.